Sắc ký FPLC là gì - Thiết bị nào cần thiết trong phương pháp sắc ký.

Sắc ký FPLC là gì - Thiết bị nào cần thiết trong phương pháp sắc ký.

29/04/2024

    Khái niệm Sắc ký FPLC là gì? 

    Sắc ký FPLC (Fast Protein Liquid Chromatography) là một phương pháp phân tích cực kỳ hiệu quả để tách, làm sạch và phân lập các protein trong mẫu. Nó là một biến thể của phương pháp sắc ký lỏng (LC) được sử dụng đặc biệt để xử lý các loại mẫu protein.

    FPLC sử dụng một hệ thống cột sắc ký được kết hợp với một máy bơm cung cấp áp lực để đẩy dung môi di chuyển mẫu qua cột. Các protein trong mẫu di chuyển qua cột theo tốc độ khác nhau dựa trên tương tác với cột và điều kiện sắc ký, cho phép chúng được tách biệt và thu được ở dạng tinh khiết.

    Công nghệ FPLC cung cấp khả năng điều chỉnh và kiểm soát chặt chẽ các điều kiện sắc ký như áp suất, lưu lượng và nhiệt độ, giúp cải thiện hiệu suất phân tách và sự tinh khiết của các protein được tách ra. Điều này làm cho FPLC trở thành một công cụ quan trọng trong nhiều lĩnh vực như sinh học phân tử, dược phẩm, và nghiên cứu y học.

    Những thiết bị cần thiết trong phương pháp sắc ký 

    Quá trình sắc ký, bao gồm cả FPLC, đòi hỏi một số thiết bị cơ bản để thực hiện. Dưới đây là một số thiết bị quan trọng cần thiết:

    1. **Hệ thống cột sắc ký**: Cột là nơi mẫu được tách ra dựa trên tương tác với chất sắc ký bên trong cột. Các loại cột khác nhau được sử dụng tùy thuộc vào mục đích phân tích và loại mẫu.

    cột sắc ký cytiva

    hình ảnh minh họa cột sắc ký cytiva

    2. **Máy bơm**: Máy bơm cung cấp áp lực cần thiết để đẩy dung môi di chuyển mẫu qua hệ thống cột. Điều này quan trọng để đảm bảo dòng chảy ổn định và đồng nhất qua cột.

    3. **Detector**: Detector giúp theo dõi và ghi lại sự thay đổi trong thành phần của mẫu khi nó chảy qua cột. Các loại detector phổ biến bao gồm UV-Vis detector, fluorescence detector, refractive index detector, và mass spectrometer detector.

    4. **Giao diện và phần mềm điều khiển**: Giao diện và phần mềm điều khiển giúp người dùng kiểm soát các tham số quan trọng như lưu lượng, nhiệt độ, và thời gian phân tích.

    Phân mềm điều khiển sắc ký UNICORN 7

    5. **Mẫu và hệ thống cung cấp mẫu**: Đây là nơi mẫu được chuẩn bị và đưa vào hệ thống sắc ký.

    6. **Bộ thu tín hiệu và phần mềm xử lý dữ liệu**: Bộ thu tín hiệu thu thập dữ liệu từ detector và phần mềm xử lý dữ liệu giúp phân tích và hiểu biết thông tin từ dữ liệu thu được.

    7. **Phụ kiện và vật liệu tiêu hao**: Bao gồm các loại cột sắc ký, màng lọc, và dung môi phân tích cần thiết cho quá trình sắc ký.

    Những lưu ý trong quá trình FPLC

    Trong quá trình sắc ký FPLC, có một số lưu ý quan trọng cần được xem xét để đảm bảo hiệu suất và độ tin cậy của phân tích. Dưới đây là một số lưu ý quan trọng:

    1. **Chuẩn bị mẫu**: Mẫu cần được chuẩn bị cẩn thận để loại bỏ các tạp chất và tăng cường tinh khiết. Điều này có thể bao gồm lọc mẫu qua bộ lọc vật lý hoặc sử dụng phương pháp khử protein.

    2. **Chọn cột phù hợp**: Chọn cột sắc ký phù hợp với mục đích phân tích và loại protein cần tách ra. Các cột khác nhau có các tính chất phân tách và giữ protein khác nhau.

    3. **Tối ưu hóa điều kiện sắc ký**: Điều chỉnh các tham số như lưu lượng dung môi, áp suất, và nhiệt độ để tối ưu hóa hiệu suất phân tách và tinh khiết của protein.

    4. **Kiểm soát dòng chảy**: Đảm bảo rằng dòng chảy qua cột ổn định và đồng nhất để đảm bảo kết quả phân tích nhất quán.

    5. **Đánh giá hiệu suất phân tích**: Sử dụng các tiêu chí như độ phân tách, thời gian phân tách và tinh khiết để đánh giá hiệu suất của quá trình sắc ký.

    6. **Kiểm soát nhiễu và độ nền**: Đối với các detector quang học, kiểm soát nhiễu và độ nền là rất quan trọng để đảm bảo rằng tín hiệu thu được là chính xác.

    7. **Bảo dưỡng hệ thống**: Thực hiện bảo dưỡng định kỳ cho các thiết bị và cột sắc ký để đảm bảo chất lượng và độ tin cậy của dữ liệu.

    8. **Ghi chú và ghi lại thông tin**: Ghi chú tất cả các thay đổi và điều kiện quan trọng trong quá trình sắc ký để có thể tái tạo và đánh giá lại kết quả sau này.

    Bằng cách tuân thủ các lưu ý này, người thực hiện có thể đạt được kết quả phân tích chính xác và tin cậy trong quá trình sắc ký FPLC.

    Tham khảo : Hệ thống sắc ký FPLC CYTIVA AKTA PILOT 600

     

    Bài viết khác